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用于研究植物质外体空间三维结构的树脂铸型技术

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发布时间:2016-10-21 11:39:13

  用于研究植物质外体空间维结构王明艳1孟丽军2张秀军3华北煤炭医学院形态实验中心唐山0630CB2唐山大学化工系唐山唐山师范学院生物系唐山空间,如木质部管状分子的腔隙。与气孔相连的叶肉细胞间的通气系统。分泌腔等等。这种空间的维结构可借助于扫描电子显微镜8肘研究。但问是。用3肘直接观察不到个组织或细胞切面内部铸型。反映管壁结构的各种形象被印在铸型的面上。在3,下可对质外体空间进行详细研究。树脂铸型技术在结构植物学的研究上有重要的意义。

  在植物解剖学和木材解剖学对组织或细胞内部空间结构的研究中,般采用切片法和整体观察法。由于这些方法的局限性,方面很难获得个切面内部腔隙的像;另方面,既使使用3碰观察个样品的整体,如木质部导管,由于样品前面的细胞和空间的遮杓。使。更深些的间阳像变得暗淡,而不能楚,本文绍的树脂铸咽法解决厂,国家自然科学基金资助项目,怨翥智您王明艳,女。36多毕业河北大学生物系。实验师。从事生物实验教学工环氧树脂网01编辑。

  这问。其基本过程是先向腔内注入某种成形物如树脂,待该物硬化后再把植物组织腐蚀掉。以到的即是,腔的1制品铸型如咭,树月旨铸型法最早应用于动物学和医学的研究添,1必3,1971;田中敬等,1984.

  后来有人用相似的技术研究植物的组织此等,1975;01等,1976;18也等,19791等1975次在木材解剖学中应用此法,用来研究胶合板中分离的酚醛树胶层的形态。86出和阳如1991运用并进步发展了这种方法。不仅得到了各种腔隙的铸型,而且获得了保留木材导管维组织结构的铸型。所得的铸型非常精确地复制了内腔的所有空隙,甚至单纹孔这样小的空间。另外,铸型在3,下观察清晰度很高。

  我们最近也在木质部解剖学的研究中运用了这技米并且取得了很好的结果。下面结合此法在木质部解剖结构研究中的应用,对其环氧树脂网01编辑以详细介绍。

  1样品的前期处理1.1千燥由于所选用的注入剂为不溶于水的树脂,故样品应预先干燥。干燥有许多方法可选择包括自然干燥临界点干燥等。

  1.2修理把样品修理成合适的大小。般0.5削方,高即可。

  2渗透涔透的目的适仲液体树脂涔入样品内部的腔隙。树脂的选择和渗透方法对实验的成功与否3又重要,2.1树脂的选择叫选择的树脂。,乙插7祀甲,河,酸醋以,7.

  2.1.1苯乙稀8峡粘度低,在室温下几周内都保持液体状态。聚合时应加入1过氧化苯甲徼71口6106,以加速聚合。由于苯乙稀的粘度低,用它可以渗透大块材料,也能得到所有细胞的铸型。

  2.1.2甲基丙稀酸酯methylmetluK7tote较准乙烯粘度高,在用l5,丙烯酸酯时应2.2渗透方法根据研究目的选择渗透方法。现简介如下。

  2.2.1真空线法即样品端连个扛空线,另端吸管加入树脂。

  2.2.2包埋为了研究样品中所有类型细胞的铸型,把样品完全浸入液体树脂,经过较长时间的渗透,树脂会进入所有具腔的细胞内。

  2.2.3抽真空样品放入树脂中,在真空干燥器内抽真空。

  2.24如果是在50酒精中保存的样品,可经过浓度梯度酒精系列,最后转入树脂溶液内,省去了干燥的步骤。

  2.2.5用注射器将部分聚合后的树脂注入样品。此法适于研究管间纹孔式木材导管间的维组织结构等。

  3聚合4样品的消化处理木材组织的消化般采取连续使用两种溶液的方法。第液是等量的过氧化氢和冰醋酸溶液,目的是去掉木质素。第液是浓硫酸,目的是去掉壁多糖。加入浓硫酸时会发生放热反应,故应在冷水浴中进行。也可以用酸注氯化钠溶液代替第液,用氢氟酸代替第液。但这两种溶液都有毒,使用起来应非常小心。

  5清洗经浓硫酸处理后,用流水漫漫洗去残渣。如果强烈冲洗或用超声波处理样品,得到的将是单独的铸型。如单个的导管或纤维铸型。

  6观察得到的铸型可以在光学显微镜或解剖镜下镜检和观察。进步详细的观察则需在3下。用3通观察前,必须对铸型进行干燥处理,然后喷镀金属膜。般选用低速电压,以顷斜角相差710拍下两张立体照片以环氧树脂网01编辑记录,也可以选择局部像拍照。

  树脂铸型法非常适合于研究植物体内微小的管道系统或腔隙,控寻其内部构造。除应用于木材解剖上之外,还可大量应用于其它方面的研究。例如,寄生生物在寄主内钻的管道柱等的内部腔隙等均可采用树脂铸型法进行研究。

  田中敬,永谷隆编辑李文镇,应国华等译。解扫描电子显微镜生物样品制备。北京科学出版社

用于研究植物质外体空间三维结构的树脂铸型技术

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